ADN recombinante Natural y Artificial

Imagen obtenida de: https://es.wikipedia.org/wiki/Tecnolog%C3%ADa_de_ADN_recombinante

ADN recombinante natural: De forma natural se puede hablar de crossing over o recombinación genética que existe en los seres vivos para su variabilidad, donde existe el intercambio de información genética. (1)

 ADN recombinante artificial. (2)

Tema:   Estudio de la proteína HINT1: actividad SUMO proteasa, regulación de canales TRPs e implicación en el síndrome bipolar y la actividad motora 

Objetivo: Identificación de proteínas. 

Gen o secuencia a clonar: El gen HINT1 y RECK, no menciona el tamaño en pares de base. 

Enzima de restricción: Enzimas de restricción SgfI y PmeI.

Enzima Ligasa: T4 ADN ligasa y ubiquitina ligasa SCF

Vector: vector pFN2A (GST). 

Célula receptora: Para la replicación de los plásmidos y posterior expresión de las proteínas recombinantes se utilizó la cepa bacteriana KRX (derivada de E. coli) . 

Mecanismo de transferencia o inserción de genes: Se recurrió al método de transformación, el cuál es la inserción del gen, en este caso se utilizo lisis alcalina y choque térmico. 

Método de identificación de clones: Cultivo. 
Gen: PCR
Productos:  Electroforesis de proteínas y transferencia a soporte sólido: detección inmunológica (western blot). 
Inoculación a ratas: Animales KO 
Se expresaron las proteínas estudiadas en el artículo. 

Bibliografía 

(1) de Meneses B, Délio R. ADN – Recombinante: biotecnologia, ontologia e protologia. 2017 [citado el 24 de julio de 2022]; Disponible en: https://repositorioslatinoamericanos.uchile.cl/handle/2250/218620

(2) De Medicina F, Montero EC, Garzón J, María N, Madrid RM. UNIVERSIDAD COMPLUTENSE DE MADRID [Internet] 2021. Ucm.es. [citado el 24 de julio de 2022]. Disponible en: https://eprints.ucm.es/id/eprint/66947/1/T42748.pdf